熒光顯微鏡及熒光數(shù)碼成像拍照的選擇及注意事項

熒光顯微鏡以及熒光拍照相機(顯微鏡相機)

熒光顯微鏡是用短波長的光線照射用熒光素染色過的被檢物體，使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長波長的熒光，然后觀察。熒光顯微鏡廣泛應(yīng)用于生物，醫(yī)學等領(lǐng)域等

⑴熒光顯微鏡—般分為透射和落射式兩種類型。

a.透射式激發(fā)光來自被檢物體的下方，聚光鏡為暗視野聚光鏡，使發(fā)光不進入物鏡，而使熒光進入物鏡。它在低倍情況下明亮，而高怕僅暗，在注漫和淘中時，較誰操作，尤以低倍的照明被圍準于確定，但能得到很暗的視野背景。透射式不使用于非透明的被檢物體。

b.落射式目前幾乎被淘汰，新型的熒光顯微統(tǒng)多為落射式，光源來自被檢動依的上方，在光路中具有分光鏡，所以對透明和不適明的被檢物休體都適用。由于物確起了聚光接的作用，不僅便于操作，而且從低倍到高倍，可以實現(xiàn)整個視場的均勻照明。

(2)熒光鏡檢術(shù)的注意事項

a.激發(fā)光長時間的照射，會發(fā)生光的衰減和淬滅現(xiàn)象，因此盡可能縮短觀察時間，暫時不觀察時，應(yīng)用擋板遮蓋發(fā)光。

b.作油鏡觀察時，應(yīng)用無熒光鏡油"。

c.做熒光實驗，普遍熒光比較弱，應(yīng)在較暗的室內(nèi)進行。電源可裝穩(wěn)壓器，否則電壓不穩(wěn)不僅會降低汞燈的壽命，也會影響效果，目前新研究領(lǐng)域都會用到熒光顯微鏡，如基因原位雜交FISH)等。

熒光拍攝通常需要使用制冷型CCD（成像系統(tǒng)相機），因為制冷CCD可以減少背景噪聲，對弱熒光信號采集很有好處，特別是像單分子成像。采集強光信號不一定要用制冷CCD，可使用黑白相機，彩色相機不適合熒光采集，因為其感光度低、分辨率也低，除非熒光信號很高，對分辯率要求不高或者使用雙通道濾色片時才適合用彩色相機。

熒光顯微鏡可以用啟步BM1000Z 2000Z  BM4000D BM3000D，進口可使用奧林巴斯BX53、BX43、CKX53。尼康NI、CI系列等都可以，相機也可以用我公司的BSW-CD-16 BSW-CD-630 BSW-CD-230等都是不錯的選擇。