PCR儀的一些相關(guān)知識介紹

更新時間：2020-11-14

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　　PCR是聚合酶鏈反應的簡稱，是在短時間內(nèi)體外大量擴增特定的DNA片段的分子生物學技術(shù)。自動完成聚合酶鏈反應，提供DNA擴增的溫度條件而設(shè)計的儀器稱為PCR儀。

　　PCR儀主要用于DNA片段的放大，可將DNA分子或某一DNA片段于數(shù)小時內(nèi)擴增至十萬乃至百萬倍，在這過程中主要是3個特征溫度循環(huán)：

　　1、高溫變性：把樣品加熱至90～95℃讓DNA模板變性變成單鏈。

　　2、低溫退火：讓樣品的溫度迅速下降至50～65℃,引物就可以結(jié)合到模板上去。

　　3、適溫延伸：讓樣品的溫度上升至70～75℃,DNA聚合酶就可以從引物開始用底物復制出新鏈。

　　因此，在PCR反應過程中對溫度控制的要求很高，良好的溫度控制是PCR儀質(zhì)量好壞的關(guān)鍵。

　　基因擴增的基本要素：

　　1、DNA模板：待拷貝的DNA稱為模板，它可以是雙鏈DNA也可是單鏈DNA，Z后擴增得到的產(chǎn)物是雙鏈狀態(tài)的。

　　2、引物：是DNA復制的先鋒，就象結(jié)晶過程中的晶核，引導DNA的合成。在PCR擴增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。

　　3、DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)：是DNA復制的動力，在dNTP等底物存在時在引物的引導下沿著模板DNA合成互補的DNA鏈。

　　4、緩沖液：提供DNA合成反應所需的pH，離子強度等環(huán)境。

　　5、4種單核苷酸：dNTP，提供DNA合成原料。

　　PCR儀用途：

　　1、醫(yī)學和健康檢驗機構(gòu)臨床診斷，用于判斷檢體中是否會表現(xiàn)某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷以及基因復制。

　　2、DNA鑒定，常見于司法鑒定領(lǐng)域。

　　3、臨床分子診斷試劑和生物試劑公司藥品研發(fā)。

　　4、轉(zhuǎn)基因、微生物、動物源性成分檢測，常見于醫(yī)藥衛(wèi)生及農(nóng)產(chǎn)品檢驗領(lǐng)域。

　　2、引物：是DNA復制的先鋒，就象結(jié)晶過程中的晶核，引導DNA的合成。在PCR擴增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。

　　3、DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)：是DNA復制的動力，在dNTP等底物存在時在引物的引導下沿著模板DNA合成互補的DNA鏈。

　　4、緩沖液：提供DNA合成反應所需的pH，離子強度等環(huán)境。

　　5、4種單核苷酸：dNTP，提供DNA合成原料。